超微量分光光度計(jì)主要是用在核酸的定量跟蛋白質(zhì)的直接定量等方面。
與傳統(tǒng)分光光度計(jì)相比,超微量分光光度計(jì)具備以下優(yōu)勢(shì)特點(diǎn):
(1)所需樣品體積小,僅需0.5—2μl;
(2)不需要比色皿,用移液槍直接將樣品滴加到檢測(cè)平臺(tái)上,測(cè)量時(shí)樣品自動(dòng)形成液柱,檢測(cè)完成后只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測(cè)平臺(tái)上擦拭干凈即可,避免了因?yàn)楸壬笄逑床粌魩?lái)的交叉污染;
(3)一般具有多個(gè)光程(電機(jī)控制自動(dòng)選擇),而傳統(tǒng)分光光度計(jì)的光程為10 mm,超微量分光光度計(jì)樣品無(wú)需稀釋,測(cè)量范圍可達(dá)到常規(guī)分光光度計(jì)的50倍;
(4)氙氣閃光燈為燈源,代替了氘燈(紫外)和鎢燈(可見(jiàn)),使用壽命更長(zhǎng);
(5)不需要預(yù)熱,可隨時(shí)檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間短;
(6)顯示吸光度值的同時(shí),程序直接給出濃度值(核酸、蛋白和熒光染料);
(7)占據(jù)實(shí)驗(yàn)室空間體積比傳統(tǒng)分光光度計(jì)小很多。
使用方法:
1、打開(kāi)儀器電源開(kāi)關(guān),開(kāi)啟比色皿暗箱蓋,調(diào)節(jié)“0”電位器旋紐,使電表指針處于透光率(T)“0”位,預(yù)熱約20分鐘。
2、調(diào)節(jié)波長(zhǎng)(λ)調(diào)節(jié)旋紐,選擇需用的單色光波長(zhǎng)。
3、調(diào)節(jié)靈敏度開(kāi)關(guān),選擇適當(dāng)?shù)撵`敏度。再用調(diào)“0”旋紐復(fù)校電表透光率“0”位。
4、將比色皿暗箱蓋合上,將參比溶液(空白)推入光路,順時(shí)針旋轉(zhuǎn)“100%”電位器調(diào)節(jié)旋紐使電表指針處于透光率“100%”處。
5、按上述方式連續(xù)幾次調(diào)整透光率“0”及“100”,直至不變,即可進(jìn)行測(cè)定工作。
6、將校準(zhǔn)溶液和待測(cè)溶液推入光路,讀取校準(zhǔn)溶液吸光度(A)值。
7、將待測(cè)溶液推入光路,讀取待測(cè)溶液吸光度值。
8、根據(jù)校準(zhǔn)溶液和待測(cè)溶液吸光度值及校準(zhǔn)溶液濃度計(jì)算待測(cè)物濃度。