1.分光光度計的原理
分光光度計主要由光源、單色器、狹縫、比色池、光電轉換和數值顯示等部分組成。分光光度計的工作過程如下:光線通過一個狹縫或一個準直鏡投向單色器,單色器可以是一個棱鏡也可以是一個光柵,某類簡單儀器還可以是一片濾光片。光線在這里被分解為一個連續的色帶,或被過濾成具有一定譜帶寬度的單色光。狹縫的作用是在連續的色帶上截取一小段光譜,因而狹縫的大小或單色器的位置都影響單色光的純度或譜帶的寬度。光線通過比色池后投向半導體光電池、光電管或光電倍增管,使光信號變成電信號,微弱的電信號經放大處理和數字處理后送給顯示器顯示。
2.光源燈的更換
多數光度計的光源由一只6V或者12V、10W 或30W的溴鎢燈,承擔有紫外光部分的還要增加一只氘燈。這些光源在使用一段時間后會老化,表現為亮度下降,這時就要更換一只電壓、瓦數及形狀相同的燈泡,平日也不應將儀器的透光率(T)調至百分之百。由于每種燈泡的幾何尺寸不可能完全一致,更換時有必要調整燈的位置。氘燈的更換和溴鎢燈不太一樣,需要把卡紙放在入射光處調節燈的位置使圓型光斑最圓最亮且要處于中心位置。每次更換燈泡后還要做波長的校正,可見光部分用鐠釹玻璃濾光片529 nm, 吸收峰來校正在5-10 nm內,吸收示值最大點是529 nm 實際波長,實際波長刻度也要在儀器允許誤差范圍內。校正波長后,還要測試新光源的穩定性。方法是用一濾光片插人比色杯架中間,機器預熱30 min,然后間隔時間連續讀數并觀察讀數的變化是否符合儀器的出廠標準。如讀數重復性較差需重新更換燈泡并重復以上工作。紫外光部分方法基本與可見光相同,不同點是利用氘燈的特征譜線486.0 nm和656.1 nm 進行校正。先將波長調至待測波長附近,再將透光率t調至50%后緩緩增加或減少波長,同時觀察透光率的變化,在待測波長附近透光率最高一點便是正確的波長位置。要特別注意在更換燈泡時一定要帶上棉手套,以免讓指印污染燈泡表面影響了燈泡亮度。
3.光電元件的更換
光電元件在加電的情況下受到強光照射很可能造成不可逆的損壞,這是由于過量的光子激發使光電極表面有過量的電子逸出而加速了光電極老化造成的。因而在更換各類光電元件時,不能在加電的情況下進行且要避免強光直接照射。—般的情況下,光電元件是裝置在一個密封完好的黑匣中,它既可防潮,也可避免雜散光。但它輸出阻抗非常高,稍受潮濕便發生漏電,造成電路的不穩定、儀器不能正常工作。因此,更換光電元件時,要注意防潮。電真空一類的光電元件比較嬌氣,不宜久存,最好現購現用。如果需要儲備,要注意避光和防潮。